بکارگیری تکنیک multiplex pcr جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxa ، ctxb و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران

زمینه و اهداف: سویه های سم زای(toxogenic) ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxa،ctxb و zot هستند، نسبت به سویه های غیرسم زابیماری شدیدتری ایجاد می کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه های سم زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به کارگیری روش multiplex pcr برای جداسازی هم زمان ژن های ctxa ، ctxb و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران طراحی گردید. مواد و روش کار: در این مطالعه 73 سویه بالینی جمع آوری و با آزمایش های سرم شناختی و زیست شیمیایی به عنوان ویبریوکلرای o1 تشخیص داده شدند. در نهایت به منظور شناسایی ژن های ctxa ، ctxb وzot از روش multiplex pcr استفاده شد و سپس نتایج حاصل با نرم افزار آماری spss16 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: برطبق نتایج حاصل از multiplex pcr، فراوانی ctxa ، ctxb و zot به ترتیب (66 نمونه) 90.4 %، (66 نمونه) 90.4 % و(67 نمونه) 91.7 % بود. نتایج ما نشان داد که multiplex pcr روشی سریع و دقیق برای جداسازی ویبریوکلرا سم زا در نمونه های بالینی است. هم چنین حساسیت این روش برای جداسازی سویه های ویبریوکلرا که واجد ژن های ctxa ، ctxb وzot هستند، کمتر از 10 کپی ژن مورد نظر در نمونه است. نتیجه گیری: در صورتی که پرایمرهای اختصاصی ( ژن های هدف ctxa ، ctxb وzot ) برای تشخیص ویبریوکلرا سم زا به کار برده شود، روش multiplex pcr یک روش ساده، راحت و نسبتاً ارزان برای جداسازی سریع و دقیق ویبریوکلرا سم زا در نمونه های کلینیکی است.